常用培養(yǎng)基的制備及注意事項一、實驗目的了解培養(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實驗原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產物所需要的營養(yǎng)物質的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。根據微生物的種類和實驗目的不同，培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應用較普遍和較普通的細菌基礎培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質，所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質變性從而達到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側。海南培養(yǎng)基制備器價格

制備培養(yǎng)基的操作要點：用過的玻璃器皿：凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時沖洗，吸取過化學試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經過適當消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸，其作用是將有機物氧化成可溶性物質，以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用，使用時應特別小心，避免濺到衣服、身體和其他物品上。吉林自動攪拌培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點：半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的購置：從培養(yǎng)基自身的質量來看，不同生產廠家的產品，甚至同一廠家不同批號的產品都會存在差異。依據ISO/IEC17025《檢測和校準實驗室能力的通用要求》，對培養(yǎng)基的供應企業(yè)進行評價后選擇合格的供應商，這是培養(yǎng)基購買過程中重要的步驟。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業(yè)；企業(yè)是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。要求生產企業(yè)提供：培養(yǎng)基成分名稱及產品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術數據清單、質控證書以及必要的安全/危害數據等材料。

制備培養(yǎng)基的操作要點：a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物，液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等，以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實際中用得十分普遍。在實驗室中，它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時可用來觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種。培養(yǎng)基制備器一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應拆疊成折扇成漏斗形。

培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式，它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面，常被簡稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離，測定菌絲生長速度，觀察菌落的形態(tài)，拮抗實驗，測定接種空間雜菌數。平板培養(yǎng)基制作方法如下：將培養(yǎng)皿洗凈、干燥，使各培養(yǎng)皿蓋方向一致，用牛皮紙包好，或放入特制鐵罐內，注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無菌箱或超凈工作臺內，先左手持三角瓶,右手反轉手掌用中指和無名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時將三角瓶轉換至右手，而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開一縫，至瓶口剛好伸人。三角瓶口經火焰燒灼后，傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上，以免沾染皿壁)，迅速蓋好皿蓋，置于桌上輕輕旋轉平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水，可將平皿蓋打開倒置于37℃溫箱，除去冷凝水，否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過多，也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)：一體化控制;主機和選配件（附加劑泵）可通過Mediafill觸摸屏一起控制。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入，也可用注射器從硅酮膜注入。海南培養(yǎng)基制備器價格

對LST（月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯）培養(yǎng)基進行滅菌時，有時發(fā)酵管內會有氣泡。為防止發(fā)酵管內產生氣泡，可以采取以下幾項措施：（1）小倒管浸滿培養(yǎng)基（不留氣泡）后再加入到盛LST的試管中。（2）滅菌鍋關閉放氣閥前，將鍋內氣體排干凈。（3）試管塞不要塞得太緊（使用硅膠塞的時候），勿使用橡皮塞。（4）不要過早打開滅菌鍋，要等滅菌鍋內氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡，可用水做培養(yǎng)基組的對照試驗，若培養(yǎng)基組有氣泡，而對照組沒有氣泡，可確定是培養(yǎng)基自身的原因。海南培養(yǎng)基制備器價格

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